El método Kjeldahl se utiliza para determinar el contenido de nitrógeno en muestras orgánicas e inorgánicas. El análisis Kjeldahl consta de tres pasos: digestión, destilación y titulación. Durante el paso de digestión catalítica, el nitrógeno orgánico (excepto los grupos nitro y azo y el nitrógeno en los anillos) se convierte en amonio. El hidróxido de sodio se agrega justo antes del paso de destilación para convertir el amonio en amoníaco. A través de la destilación al vapor, este último se transfiere al recipiente receptor que contiene un agente absorbente (por ejemplo, ácido bórico). Finalmente, el amoníaco separado se titula con ácido sulfúrico.

El contenido de proteínas en las muestras también puede determinarse a partir del contenido de nitrógeno obtenido por la configuración Kjeldahl. USP<461> describe el método de titulación para determinar el contenido de nitrógeno en productos orgánicos utilizando la configuración de nitrógeno Kjeldahl. Esta Application Note ilustra la determinación de nitrógeno en heparina sódica.

El análisis se demuestra en heparina sódica. Se pesa con precisión una cantidad adecuada de heparina sódica y se transfiere a un matraz limpio de fondo redondo de dos bocas. Se agregan sulfato de sodio, sulfato de cobre y ácido sulfúrico para el proceso de digestión. El contenido se calienta suavemente por debajo del punto de ebullición hasta que cesa la formación de espuma. Luego se vuelve a calentar a una temperatura más alta hasta que el contenido hierve y la solución se vuelve marrón. El contenido se enfría y se agrega cuidadosamente agua libre de dióxido de carbono mientras se mezcla bien. Se añade solución de hidróxido de sodio a través del cuello lateral del matraz de fondo redondo. Se agrega zinc granulado y el matraz se conecta inmediatamente a la instalación de destilación de nitrógeno Kjeldahl. La salida de la instalación se pone en una solución de ácido bórico. La destilación se lleva a cabo hasta que aproximadamente el 80% del volumen total se transfiera a la solución de ácido bórico.

Se obtienen curvas de valoración nítidas cuando el punto de equivalencia se determina de forma fiable mediante el control táctil o tiamo^TM.

El contenido de nitrógeno determinado de la heparina sódica es 1,581 % (SD(rel) = 1,48 %, n = 5), que está dentro del contenido de nitrógeno especificado por la USP (1,3 % a 2,5 %) para la heparina sódica.