UV検出イオンクロマトグラフィーによる食肉製品中亜硝酸塩・硝酸塩の測定

サンプル（50 μL）は、インライン限外ろ過の後、IC システムに注入しました。亜硝酸塩と有機成分との共溶出を避けるため、特性の異なる 2 本のカラム（Metrosep A Supp 7 - 250/4.0 と Metrosep A Supp 5 - 50/4.0）を直列に接続して使用しました。分析対象成分は、炭酸塩/メタノール溶離液（3.6 mmol/L Na₂CO₃ + 15% メタノール）を用い、流量 0.7 mL/min のイソクラティックアニオン交換クロマトグラフィーで分離しました（表 1、図 1～4）。カラム温度を 52 ºC にすることで、亜硝酸塩ピークの分離能がさらに向上しました。 シーケンシャルサプレッションによりバックグラウンドノイズが低減され、高感度な UV/VIS 検出（205 nm）が可能になりました。定量は、亜硝酸塩では 0.02～2.00 mg/L、硝酸塩では 0.05～5 mg/L の範囲で行いました。

サンプル濃度は、硝酸ナトリウムおよび亜硝酸ナトリウムとして算出しました。システムを有機汚染物質のない清浄な状態に保つため、各分析の後にサンプル流路をメタノール/UPW（1:1 v/v）でリンスし、サプレッサーは硫酸（500 mmol/L）、シュウ酸（100 mmol/L）、アセトン （20% v/v）の混合液で再生しました。

図 1～4 は、試験したさまざまな食肉サンプルの代表的なクロマトグラムを示しています。亜硝酸塩濃度は検出不可から 54 mg/kg まで、硝酸塩濃度は 10～50 mg/kg の間で変動しました。これらの試験において、亜硝酸塩が基準値である 50 mg/kg を超えたのは 1 つのサンプル（豚肩肉）のみで、硝酸塩は常に許容濃度の上限を十分に下回る値で測定されました [4]。食肉メーカーの品質管理検査室における長期的な試験により、この IC メソッドが亜硝酸塩および硝酸塩のルーチン分析に十分な堅牢性と精度を備えていることが実証されています。

この汎用性の高い分析法は、飲料や野菜のサンプルにも適しています。さまざまな食品および飲料サンプルを評価した結果、対称性のあるピーク、濃度値の高い再現性、そしてマトリックス成分による妨害がごくわずかであることが示されました。定量下限は、試験したすべてのサンプルにおいて、亜硝酸ナトリウムおよび硝酸ナトリウムとも 5 mg/kg を大きく下回りました。

前述のサンプル前処理とクロマトグラフィー法は、試験したすべての食肉製品で有効でした。2 本の分離カラムを用いた本 IC メソッドは、亜硝酸塩および硝酸塩を妨害マトリックスのピークから最適に分離できることを保証し、複雑なマトリックスであっても品質管理のための高感度な分析を可能にします（食肉製品の LOQ <5 mg/kg）。このメソッドはすでに一部の食品検査室で品質管理の標準法として確立されており、食品マトリックスに左右されない高い精度と再現性を示しています。

インライン限外ろ過により、サンプル前処理が簡便で、従来の一部の方法のように高価なサンプル前処理用カートリッジを必要としないため、このメソッドは迅速で時間を節約できるルーチン分析にさらに適したものとなります。妨害となるマトリックスはインライン限外ろ過によって除去されるか、分析カラム上で十分に分離されるため、このメソッドは、従来の HPLC-UV と比較して、食肉サンプル中の亜硝酸塩および硝酸塩の測定において優れた分析性能を示します。

亜硝酸塩と硝酸塩は直接定量されます。これは、全窒素の総和パラメータを測定する従来の方法（例：AOAC 公定法 935.48 または 993.03）に対する利点です。