Rilevamento di tracce di rodamina B nel peperoncino di Cayenna in polvere

L'aggiunta di coloranti per fornire una colorazione uniforme e migliorare l'appeal visivo nei prodotti alimentari è una pratica comune. La rodamina B è un colorante ampiamente utilizzato nelle applicazioni industriali e biotecnologiche, nonché uno dei tanti coloranti il cui utilizzo come additivo alimentare è stato vietato in Europa e Nord America. I metodi analitici più utilizzati per il rilevamento di coloranti illeciti nei prodotti alimentari, GC/MS e HPLC, prevedono l'uso di strumenti in laboratorio e richiedono una formazione specialistica. Con Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer), il rilevamento di tracce di rodamina B nel peperoncino di Cayenna tritato è rapido e facile, a seguito di una procedura semplice di estrazione con consumo di materiale minimo. La rodamina B può essere rilevata nel peperoncino di Cayenna in polvere a una concentrazione di 50 μg/g. Tuttavia, un semplice passaggio di concentrazione migliora tale limite a 10 μg/g.

Il peperoncino Cayenna in polvere acquistato in commercio è stato drogato con rodamina B (RhB) e testato con Misa per simulare uno scenario di screening alimentare realistico.

Figure 1. Spettro di riferimento standard Gold NP SERS della rodamina B.

Per stabilire uno spettro di riferimento, è stato analizzato uno standard RhB puro (50 μg/g in acqua ultrapura) utilizzando nanoparticelle d'oro (Au NP). Lo spettro SERS unico mostrato in Figura 1 può essere utilizzato per creare una voce di libreria per RhB.

Aggiunta della soluzione del campione alla fiala per la misurazione

È stata preparata una soluzione madre di RhB in metanolo. La polvere di Cayenna acquistata è stata trattata con diluizioni seriali di stock (3 mL di stock a 1 g di Cayenna) per produrre campioni con 1000, 500, 100, 50, 10, 5 e 1 μg/g di RhB. I campioni sono stati accuratamente miscelati e asciugati all'aria. Per preparare gli estratti, 0,1 g di ciascun campione addizionato è stato aggiunto a una fiala con 400 μL di metanolo, agitato per miscelare e lasciato riposare per 10 minuti. Per preparare i campioni di prova, 50 μL dell'estratto di metanolo sono stati pipettati in una fiala con 400 μL di soluzione Au NP e 50 μL di soluzione salina 0,5 mol/L. La fiala è stata agitata per miscelare, quindi collocata nell'attacco della fiala su Misa per il test.

**Tabella 1.** Parametri sperimentali
Strumento		Acquisizione
Firmware	0.9.33	Potenza laser	5
Software	Misa Cal V1.0.15	int. Ora	10 sec
Misa Fiala Allegato	6.07505.040	medie	10
Kit di identificazione - Au NP	6.07506.440	Raster	SU

Nella figura 2, gli spettri sovrapposti di RhB indicano un rilevamento fino a 50 μg/g. Per ciascuna concentrazione testata, lo spettro di base del peperoncino di Cayenna non adulterato è stato sottratto dalla media delle misurazioni replicate corrette per la linea di base.

Figure 2. Profilo di concentrazione Gold NP SERS di RhB estratto da polvere di Caienna adulterata. Gli spettri sono valutati come base, con Au NP e controllo sottratti.

Per migliorare il rilevamento delle tracce e il rapporto segnale-rumore spettrale, a ciascun estratto è stato applicato un metodo di concentrazione molto semplice. Tutti gli estratti sono stati completamente essiccati all'aria, quindi risospesi in metanolo per ottenere un aumento della concentrazione di 5 volte. Gli spettri dentrola Figura 3 dimostrano il rilevamento di RhB fino a 10 μg/g.

Figure 3. Profilo RhB dopo concentrazione 5x.

Rilevazione di rodamina B in campo

Usando l'estremità grande della paletta, aggiungi 3-4 misurini di campione in una fiala da 2 ml. Aggiungi metanolo alla fiala fino a ~1/3 pieno. Chiudi e agita delicatamente la fiala per mescolare, poi lascia riposare il campione per 2 minuti. Riempi a metà una fiala pulita di Au NP. Usando le pipette, aggiungi 1 goccia in ciascuna soluzione campione la soluzione di NaCl alle Au NPs, tappa e agita delicatamente il flaconcino per mescolare. Inserisci l'attacco fiala su Misa per la misurazione.

**Tabella 2.** Requisiti per il protocollo di test sul campo
Kit ID - Au NP	6.07506.440
Include:	Nanoparticelle d'oro (Au NP)
	Notizia in anticipo
	Pipette monouso
	Fiale di vetro da 2 ml
Reagenti
Metanolo
soluzione di NaCl	3 g di NaCl in 100 ml di acqua
Impostazioni di prova	Utilizzo Kit ID OP su MISA

Tracce livelli di rilevamento, facilità di preparazione del campione e tempi di analisi rapidi raccomandano collettivamente Misa come una soluzione affidabile ed economica per l'identificazione in loco ad alta produttività di prodotti alimentari adulterati.

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Metrohm Italiana Srl

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