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La carbendazima (MBC) es un fungicida común aprobado para su uso regulado en la agricultura a nivel mundial, fuera de la UE. La mayor parte de la MBC se encuentra en las frutas como contaminación superficial, como resultado de los aerosoles aplicados antes de la cosecha. La Agencia de Protección Ambiental de los Estados Unidos ha determinado que una concentración inferior a 80 μg/mL en el zumo de naranja no constituye un riesgo para la salud, mientras que la UE restringe los niveles de MBC a 10 ng/g (de productos importados) en los alimentos destinados a la producción de alimentos para bebés. Fuera de este amplio rango de aceptación, se acepta que el MBC interrumpe la producción de hormonas y puede dañar los testículos en los hombres. En los EE. UU., las fresas son las frutas enteras más comúnmente contaminadas con MBC, según lo determinado por el USDA con GC/MS y LC/MS.

Esta Application Note describe una prueba muy simple para la MBC superficial y proporciona los espectros de la librería que demuestran la detección sensible de la MBC con el Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer).

El uso agrícola más común de MBC es un rocío de 500 μg/mL aplicado en el campo, 2 a 3 semanas antes de la cosecha. La detección de contaminación superficial es un ensayo muy rápido y fácil, ideal para pruebas in situ con Misa.

Para establecer un espectro de referencia para MBC, se analiza un estándar puro en metanol utilizando nanopartículas de oro (Au NP). El espectro SERS único presentado en Figura 1 se puede utilizar para crear una entrada de biblioteca para MBC.

Figure 1. Espectro de referencia de carbendazim SERS Au NP estándar.
https://s7e5a.scene7.com/is/image/metrohm/5162-Misa-Samples?ts=1641569545301&dpr=off

Las fresas compradas se lavaron con agua antes de la prueba. Se roció una solución de 100 mg/L de MBC en etanol sobre fresas enteras para imitar una aplicación típica en una granja. Una vez seco, cada fresa se enjuagó con 4 mL de etanol. El volumen de enjuague se recogió y se concentró a 1 ml por evaporación del solvente en una placa caliente de laboratorio. Las muestras de Misa se prepararon agregando 100 μL de muestra a 800 μL de Au NP y 100 μL de 500 mmol/L de NaCl.

Tabla 1. Parámetros experimentales
Aparato Adquisición
firmware 0.9.33 Potencia del láser 5
Software MisaCal V1.0.15 En t. Tiempo 1 s
misa vial Adjunto archivo 6.07505.040 Promedios 10
Kit de identificación - Au NP
6.07506.440 Trama EN

Un espectro corregido de línea de base adquirido de fresas enteras rociadas con una solución de 100 mg/L de MBC, luego enjuagada con etanol concuerda con el espectro de referencia estándar de MBC obtenido (Figura 2).

Figure 2. Detección de 100 mg/L de MBC con Misa.

Detección de carbendazim en el campo

Coloque una fruta entera (p. ej., fresa, naranja) en un vaso de precipitados lo suficientemente grande como para contenerla. Enjuague con 4–6 pipetas llenas de etanol. Retire la fruta y reduzca el volumen de etanol, mediante evaporación en una placa caliente, a ~ 1 mL. llenar un vial limpio medio lleno con Au NPs. Usando pipetas, agregue 2 gotas de solución de etanol reducido y solución de NaCl a Au NP, tape y agite suavemente el vial para mezclar. Inserte en el accesorio del vial en Misa para medir.

Tabla 2. Requisitos para el protocolo de prueba de campo
Kit de identificación - Au NP 6.07506.440
incluye: Nanopartículas de oro (Au NP)
Cucharón
Pipetas desechables
viales de vidrio de 2 ml
Reactivos  
Etanol  
solución de NaCl 3 g de NaCl en 100 ml de agua
Cristalería Vaso de precipitados de 50–250 ml
Configuración de prueba Utilizar Kit de identificación OP en MISA

Después de una detección experta de MBC en frutas enteras, está claro que Misa es una solución excelente para el análisis de la contaminación de la superficie de los productos en cualquier entorno: en la granja, en el mercado o en la planta de procesamiento. ¿Quiere confirmar el estado «orgánico»? Los pesticidas, fungicidas y herbicidas son posibles objetivos para el poderoso análisis in situ de Misa.

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