Rilevamento di tracce di tiabendazolo sulle banane

Il tiabendazolo (TBZ) è un pesticida ad ampio spettro utilizzato sia come fungicida per frutta e verdura, sia per il controllo dei parassiti nel mangime per animali. Mentre alcuni individui sperimentano effetti collaterali negativi dal consumo di alimenti che contengono TBZ, la tossicità complessiva per l'uomo è molto bassa. Per garantire la sicurezza dei consumatori, le autorità normative stabiliscono dei livelli massimi di residuo (MRL) per i raccolti trattati con pesticidi in base all'analisi di studi di valutazione del rischio. Per le banane, trattate con soluzioni protettive di TBZ, mediante spruzzo sulla superficie o immersione, l'agenzia FDA degli Stati Uniti ha fissato un MRL di 3 μg/g, mentre nell'UE il limite MRL è di 6 μg/g per peso.

Con Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer), il rilevamento rapido e sensibile di TBZ sulle banane viene mostrato in formati facilmente adattabili ai test di monitoraggio della sicurezza alimentare. I substrati SERS per Misa offrono una flessibilità di campionamento senza precedenti: dall'immersione al tampone, P-SERS può essere adattato all'applicazione desiderata.

Questa Application Note descrive la semplice estrazione e rilevamento di residui di TBZ sulle bucce di banana e in un prodotto a base di banana trasformato. I campioni vengono applicati sulle strisce Silver P-SERS (Ag P-SERS) attraverso immersione e metodi di tampone.

Per stabilire uno spettro di riferimento per TBZ, è stato analizzato uno standard puro in metanolo (10 μg/mL) utilizzando Ag P-SERS. Lo spettro SERS unico mostrato in Figura 1 può essere utilizzato per creare una voce nella libreria per TBZ.

Figure 1. Spettro standard di riferimento Ag P-SERS del tiabendazolo.

**Tabella 1.** Parametri sperimentali
Strumento		Acquisizione
Firmware	0.9.33	Potenza laser	5
Software	Misa Cal V1.0.15	int. Ora	1 s
Misa Fiala Allegato	6.07505.030	medie	10
Kit di identificazione - Ag P-SERS	6.07506.470	Raster	SU

Rilevamento di TBZ nelle chips di banana

Le patatine di banana essiccate acquistate da un droghiere locale sono state macinate in polvere fine e addizionate con TBZ in metanolo per fornire una gamma di campioni di prova: 100–0,1 μg/g. I campioni sono stati miscelati bene ed essiccati. Successivamente, 0,1 g di ciascun campione sono stati aggiunti a una fiala di vetro con 1 mL di 0,1 mol/L NaOH e agitati. Dopo l'insediamento, una striscia Ag P-SERS è stata immersa in ogni estratto, essiccata per 2 minuti e immediatamente inserita nell'accessorio Misa P-SERS per la misurazione.La figura 2 mostra l'intervallo di rilevamento di TBZ in campioni di banane essiccate macinate da 100 μg/g a 100 ng/g.

Figure 2. Gli spettri Ag P-SERS con correzione della linea di base sovrapposti per chip di banana polverizzati addizionati con TBZ mostrano un rilevamento fino a 100 ng/g.

Rilevamento di TBZ sulla buccia di banana

Per simulare il test del tampone Ag P-SERS , le banane biologiche acquistate localmente sono state lavate con acqua di rubinetto e isopropanolo/acqua distillata. Per simulare l'applicazione tipica di TBZ, una sezione della buccia di 2 cm² è stata trattata con 20 μL di metanolo contenente diverse concentrazioni (250, 100, 75, 50, 25 e 10 μg/mL) di TBZ. Dopo l'essiccazione, per tamponare la sezione è stata utilizzata una striscia Ag P-SERS inumidita con metanolo. La striscia è stata asciugata per 1 minuto e collocata nell'attacco Misa P-SERS per la misurazione, con gli spettri risultanti mostrati in Figura 3.

Figure 3. Gli spettri sovrapposti con correzione della linea di base acquisiti da tamponi Ag P-SERS mostrano il rilevamento di TBZ sulla buccia di banana a 100 ng/g.

Test diretto di una banana acquistata in negozio

In un test finale, una banana non lavata non coltivata biologicamente dai droghieri è stata tamponata con una striscia Ag P-SERS inumidita con metanolo. Nella Figura 4, il rilevamento di TBZ è confermato dalla concordanza di picco tra lo spettro del tampone di banana e quello dello standard TBZ.

Figure 4. Il test diretto di una banana non biologica non trattata acquistata da un negozio di alimentari ha restituito uno spettro Ag P-SERS coerente con il rilevamento di TBZ.

Rilevazione di tiabendazolo in campo

Utilizzando una pipetta monouso, bagna l'estremità stampata della Striscia P-SERS con 2 gocce di metanolo. Tocca solo il lato posteriore non stampato del tampone con i guanti. Utilizza la parte inumidita e stampata del striscia per tamponare la buccia di una banana. Sposta la striscia lungo la buccia per almeno 2 cm. Dopo l'asciugatura per 2 minuti, inserisci la striscia Ag P-SERS, con la porzione stampa rivolta verso il basso e verso lo strumento, nell'allegato P-SERS per la misurazione.

**Tabella 2.** Requisiti per il protocollo di test sul campo
Kit ID - Ag P-SERS	6.07506.470
include:	Argento P-SERS
	Notizia in anticipo
	Pipette monouso
	Fiale di vetro da 2 ml
Reagenti	Metanolo
Impostazioni di prova	Utilizzo Kit ID OP su MISA

Dopo che è stata dimostrata la capacità di Misa di rilevare in modo sensibile la TBZ sulle banane, un esperimento successivo conferma il trattamento post-raccolta delle banane con TBZ. Risultati di test così rapidi e accurati raccomandano Misa come una soluzione eccellente per l'identificazione semplificata in loco di alimenti trattati chimicamente.

Contatto

Metrohm Italiana Srl

Via G. Di Vittorio, 5
21040 Origgio (VA)