En los últimos años, ha aumentado el interés por los aditivos alimentarios y los suplementos dietéticos, incluidos los prebióticos como los β-galactooligosacáridos (conocidos como GOS). Los GOS son cadenas de unidades de galactosa con un extremo de glucosa opcional.1,2]. Muestran efectos bifidogénicos, es decir, favorecen el crecimiento y el bienestar de las bacterias intestinales no patógenas [1]. Inicialmente descubiertos como componentes principales del calostro (presentes hasta 12 g/L), los GOS se agregan como un suplemento prebiótico a las fórmulas infantiles para lograr efectos beneficiosos similares.

La creciente concienciación de los consumidores sobre los hábitos alimentarios saludables ha provocado el crecimiento continuo de los mercados mundiales de prebióticos y GOS. Del mismo modo, el aumento de la demanda en relación con la calidad de los alimentos ha dado lugar a normas más estrictas y completas para el etiquetado y la seguridad de los alimentos (por ejemplo, UE 2015/2283). Por lo tanto, la determinación del contenido total de GOS en los alimentos, suplementos o productos sin procesar es esencial para cumplir con tales requisitos.

Esta nota de aplicación presenta una actualización del método estándar de la AOAC para la determinación del GOS total en productos alimenticios. Con el mismo principio (hidrólisis enzimática de moléculas GOS complejas seguida de análisis cromatográfico de carbohidratos simples), se mejoró la eficiencia del método analítico a favor del tiempo de laboratorio y los costos de funcionamiento.

La separación de galactosa, glucosa y lactosa se realizó en una columna de separación Metrosep Carb 2 - 250/4.0 usando un eluyente de hidróxido (Figura 2) en un tiempo de grabación de 18 minutos. Para la limpieza de la columna, se ejecutó un gradiente de alta presión (HPG) de acetato posterior al registro en un tiempo total de ejecución de la muestra de aproximadamente 30 minutos. La detección de la señal se produjo con un detector amperométrico (945 Professional Detector Vario - Amperometry) equipado con una celda de capa fina (electrodo de trabajo de Au y de referencia de Pd). El uso de la celda de capa delgada en combinación con una forma de onda especial flexiPAD (detección amperométrica pulsada) exhibió el mejor rendimiento para el análisis de GOS. En comparación con las condiciones estándar de PAD, esta configuración proporcionó una mayor respuesta y relación señal-ruido.

Después de la preparación manual de la muestra, se usó la diálisis en línea con la celda de diálisis de bajo volumen para purificar las muestras antes de inyectarlas en el CI. Como un paso completamente automatizado, las proteínas y las moléculas más grandes se eliminan de la matriz de la muestra, protegiendo la columna y aumentando la vida útil de la columna.

El contenido total de GOS se calculó después de la evaluación automática de datos (software MagIC Net 3.3) según AOAC. En resumen, se determinó la diferencia de galactosa y glucosa entre el Ensayo 1 y el Ensayo 2 (Figura 2), corregido por lactosa inicial y finalmente ajustado a un peso de muestra de 100 g.

A lo largo del curso para adaptar y avanzar en el método estándar de la AOAC, se probaron diferentes variables y finalmente se validaron de acuerdo con los estándares comunes. Todos los detalles se dan en el artículo de acceso abierto. Ziegler et al. [3].

1. Sangwan et al. (2011), j. ciencia de la comida 76(4)
2. Boehm &amperio; Stahl (2007), J. Nutrición 137(3 suplemento 2)
3. Ziegler et al. (2001), La columna – Europa/Asia 17(02)

Internal reference: AW IC CH6-1436-032021