Apesar das nossas diferenças, há algumas coisas que todos têm em comum: todos consumimos alimentos e, como resultado, excretamos resíduos (ou seja, fezes ou fezes). A frase “você é o que você come” certamente se aplica quando se discute o tema da análise de fezes. Os laboratórios biomédicos estão equipados para testar amostras de fezes, a fim de diagnosticar uma série de doenças e outros problemas, embora os procedimentos convencionais de preparação e análise de amostras possam ser bastante tediosos e demorados. Ao utilizar a espectroscopia no infravermelho próximo (NIRS) como técnica analítica para testes de fezes, os laboratórios podem obter resultados rápidos e confiáveis sem preparação de amostras.
Determinação do teor de gordura, nitrogênio e matéria seca sem preparação de amostra
O analisador de sólidos Metrohm NIRS DS2500 provou ser um instrumento valioso para testes de fezes fáceis e confiáveis em laboratórios biomédicos. Nitrogênio e gordura fecal, matéria seca e muitos outros parâmetros importantes podem ser quantificados pelo NIRS em menos de um minuto, sem necessidade de preparação de amostra.
Dr. Laurence Barbot-Trystram do Hospital Universitário Pitié Salpêtrière - Charles Foix (AP-HP Paris, França) é bióloga médica e Ph.D. farmacêutico especializado em bioquímica. Ela utiliza este dispositivo no seu trabalho diário e concordou em partilhar as suas experiências com o resto do mundo. Fizemos várias perguntas à Dra. Barbot-Trystram sobre seu trabalho e suas impressões ao usar o analisador de sólidos Metrohm NIRS DS2500 para análise de fezes.
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- Dr. Barbot-Trystram, poderia descrever brevemente seu laboratório?
- Qual é a sua função no Laboratório de Coprologia Funcional?
- Quais análises são realizadas no laboratório de Coprologia Funcional?
- O que o convenceu a escolher a espectroscopia no infravermelho próximo (NIRS) para análises em seu laboratório?
- Uma breve introdução à espectroscopia NIR
- Quais foram os desafios que você teve que superar ao implementar o método NIRS?
- Por que você escolheu a Metrohm como fornecedora de um analisador NIR?
- Onde você usa o analisador de sólidos Metrohm NIRS DS2500?
- Preparação de amostras com espectroscopia NIR
- Qual é a sua opinião profissional sobre o uso do analisador de sólidos NIRS DS2500 para análise de fezes?
1. Dr. Barbot-Trystram, poderia descrever brevemente seu laboratório?
O Laboratório de Coprologia Funcional é chefiado pela Prof. Nathalie Kapel no Departamento «BioGeM» da Hospital Universitário Pitié Salpêtrière - Charles Foix (AP-HP Paris, França). É reconhecido na França como o laboratório de referência para a exploração bioquímica de fezes e exploração da homeostase intestinal (por exemplo, absorção de nutrientes, secreção de eletrólitos, biomarcadores fecais e produção de metabólitos bacterianos).
2. Qual é a sua função no Laboratório de Coprologia Funcional?
Como biólogo, participo do desenvolvimento e validação de novos métodos. Além disso, estou envolvido na validação médica dos resultados. Isto inclui não apenas tomar uma olhar analítico crítico dos resultados, mas também a interpretação médica baseada no confronto entre dados qualitativos e quantitativos com os da história clínica e sintomas do paciente.
Também sou responsável pelo processo de garantia de qualidade e validação de métodos de acordo com ISO 15189 credenciamento em colaboração com os demais biólogos médicos e a equipe técnica.
3. Quais análises são realizadas no laboratório de Coprologia Funcional?
Analisamos vários parâmetros em amostras de fezes. Estes incluem lipídios, nitrogênio, carboidratos, energia, metabólitos bacterianos, eletrólitos, calprotectina e elastase. Essas análises nos ajudam a:
- identificar mecanismos por trás da diarreia crônica
- explorar alterações das funções digestivas (por exemplo, má absorção)
- discriminar entre sintomas orgânicos e não orgânicos (ou seja, sintomas manifestados física/bioquimicamente com biomarcadores mensuráveis versus sintomas manifestados comportamentalmente/funcionalmente e, portanto, mais difíceis de diagnosticar)
- explorar a gravidade de vários problemas e avaliar e adaptar a gestão do tratamento (médico e/ou nutricional)
4. O que o convenceu a escolher a espectroscopia no infravermelho próximo (NIRS) para as análises em seu laboratório?
Os métodos de referência para a medição de água, lipídios (gordura) e nitrogênio nas fezes são, em sua maioria, manuais e demorados. Esses métodos requerem um longo processo de extração que leva à realização de ensaios seriados. Portanto, procuramos um método analítico mais rápido que pudesse permitir que os resultados fossem apresentados de forma ad hoc. Também queríamos limitar o uso de solventes e facilitar a preparação de amostras. A tecnologia espectroscópica no infravermelho próximo (NIRS) atende a essas especificações.
Optamos pela utilização do NIRS por vários motivos: o aspecto higiênico, sua completa automação facilitando o trabalho dos técnicos, e a rapidez das dosagens permitindo a realização diária do ensaio. Além disso, este método de análise fornece três resultados de cada vez (ou seja, lipídios, nitrogênio e hidratação) para a mesma amostra de fezes.
5. Uma breve introdução à espectroscopia NIR
A interação entre luz e matéria é um processo bem conhecido. A luz usada em métodos espectroscópicos normalmente não é descrita pela energia aplicada, mas pelo comprimento de onda ou números de onda.
Um espectrômetro NIR, como o Metrohm DS2500 Solid Analyzer, mede essa interação para gerar espectros conforme exibido em figura 1. O NIRS é especialmente sensível à presença de certos grupos funcionais como -CH, -NH, -OH e -SH.
6. Quais foram os desafios que você teve que superar ao implementar o método NIRS?
Testámos muitos analisadores NIRS de gerações anteriores de outros fabricantes, mas os resultados não foram satisfatórios, nomeadamente para amostras patológicas – fezes aquosas ou gordurosas. Portanto, estávamos bastante interessados em avaliar o analisador NIRS DS2500 da Metrohm com o novo software de processamento matemático, mas precisávamos estar convencidos de seu desempenho para todos os tipos de amostras fecais (normais e patológicas).
7. Por que você escolheu a Metrohm como fornecedora de um analisador NIR?
Escolhemos a Metrohm porque é ao mesmo tempo o fornecedor e O manufatureiro. Isto permite-nos ter apoio direto da empresa nos nossos processos de desenvolvimento e validação. Tal ligação é crucial para a implementação de processos recentemente automatizados, modificando completamente as nossas práticas anteriores. Entre todos os analisadores NIRS que testamos, o NIRS DS2500 Solid Analyzer é o mais adequado para analisar amostras fecais.
A colaboração entre os engenheiros da Metrohm e a equipe do laboratório foi essencial para validar o método em amostras patológicas (por exemplo, aquosas, gordurosas, etc.).
As pré-calibrações oferecem um analisador NIR pronto para uso para análise de fezes desde o início:
Com base em dados coletados de vários clientes que utilizam o analisador de sólidos NIRS DS2500 para análise de fezes, a Metrohm pode oferecer instrumentos pré-calibrados para uso direto.
As análises fecais realizadas no Analisador de Sólidos NIRS DS2500 (lipídios, nitrogênio, peso seco) ocorrem em duas áreas:
- Setor de rotina que agrupa as principais análises biológicas realizadas para exploração da diarreia (dosagens de nutrientes, eletrólitos e metabólitos).
- Setor especializado dedicado à avaliação nutricional e ao acompanhamento de pacientes submetidos a cirurgias digestivas, como extensas ressecções intestinais que levam à má absorção e condições de emaciação que levam à falência intestinal, bypass ou mesmo transplante intestinal.
A medição com NIRS é simples. A amostra é armazenada em um recipiente de amostra apropriado (por exemplo, uma placa de Petri) que é colocado como está no analisador. As amostras de fezes são medidas idealmente no modo de reflexão difusa. A luz refletida na amostra é coletada pelo analisador e usada para análise.
Saiba mais sobre os diferentes modos de medição para todos os tipos de amostras em nossa postagem de blog relacionada.
10. Qual é a sua opinião profissional sobre o uso do analisador de sólidos NIRS DS2500 para análise de fezes?
A mudança de outras tecnologias para o Analisador de Sólidos NIRS DS2500 foi um verdadeiro desafio para nossa equipe, passando de métodos analíticos clássicos para uma técnica física associada a um tratamento matemático. Resultou em intercâmbios interessantes entre toda a equipa, desde técnicos a biólogos.
No entanto, o analisador de sólidos NIRS DS2500 economiza tempo no nível técnico (por exemplo, preparação de amostras, medição, manutenção do analisador), permitindo uma validação médica mais rápida e, em geral, um tempo de entrega dos resultados reduzido para os médicos.
O software é fácil de usar e a preparação da amostra é fácil de entender. Treinamos várias pessoas sem dificuldade, inclusive pessoas sem experiência em laboratório.
Como a análise é não destrutiva, a amostra pode ser recuperada caso seja necessário para outros ensaios, o que pode ser interessante em alguns casos.
A facilidade de uso não deve nos fazer esquecer a necessidade de analisar criticamente os resultados. Este método espectroscópico não é clássico em biologia – as interferências devem primeiro ser revisadas antes de ser feita a implementação de rotina.
Obrigado, Dr. Laurence Barbot-Trystram por compartilhar alguns insights sobre seu trabalho. Agradecemos saber de suas experiências no gerenciamento da implementação de espectroscopia no infravermelho próximo em seu laboratório para análise de amostras fecais humanas.
Suas conclusões de conhecimento
Folheto: Pré-calibração para análise de fezes humanas
Pré-calibrações para software de espectroscopia Vision Air Vis-NIR