Fluorid beugt nachweislich Karies vor und unterstützt die Remineralisierung des Zahnschmelzes [1,2]. Neben der Fluorierung von Trinkwasser, Milch oder Salz kann Fluorid auch als topisches Fluoridpräparat in Form von Fluoridtabletten, Zahnpasten, Mundspülungen oder Gelen aufgenommen werden [2,3]. Jedoch ist die Wirksamkeit stark von der Konzentration und Dosierung abhängig. Um eine Überdosierung und Fluorose zu vermeiden sind diese Parameter ebenso entscheidend [2].
Mit Hilfe analytischer Methoden, einschließlich der Ionenchromatographie (IC), wird sichergestellt, dass Fluoridtabletten den Qualitätsstandards der United States Pharmacopeia und National Formulary (USP-NF) entsprechen.
Die IC mit suppressierter Leitfähigkeitsdetektion wurde von der USP als validierte Methode zur Quantifizierung des Fluoridgehalts in Natriumfluoridtabletten zugelassen [4]. Die Verwendung der Metrosep A Supp 16 - 250/4.0 Säule (L91) und der Einsatz eines Hydroxid-Eluenten liefert die erforderliche Trennung von Fluorid und Acetat. Die Qualifizierung erfolgte gemäß der General USP-Chapter [5-7] und erfüllte alle Akzeptanzkriterien der USP-Monographie„Sodium Fluoride Tablets“ [4].
Die Systemeignungslösung und die Standardlösungen werden aus einem zertifizierten USP-Natriumfluorid-RS-Standard durch Verdünnung mit Reinstwasser (UPW) hergestellt. Die Systemeignungslösung enthält 2,0 µg/mL Natriumfluorid (NaF) und 1,0 µg/mL Natriumacetat. Die Standardlösungen enthalten 2,0 µg/ml NaF.
Die Proben wurden aus gemahlenen Natriumfluorid-Tabletten hergestellt. Es wurden 0,215 g des Pulvers genau eingewogen und in einen 1000-mL-Messkolben überführt. Der Kolben wurde anschließend bis zur Markierung mit Reinstwasser aufgefüllt.
Um sicherzustellen, dass das Pulver vollständig in Lösung geht, wurde die Mischung für 10 Minuten ins Ultraschallbad gestellt. Die resultierende Lösung wurde dann mit einem Membranfilter mit einer Porengröße von 0,2 µm filtriert. Um eine Endkonzentration von 2,0 µg/ml NaF zu erreichen, wurde die filtrierte Lösung 1:10 mit Reinstwasser verdünnt
Proben und Standardlösungen wurden mit einem 858 Professional Sample Processor (Abbildung 1) direkt in den IC injiziert.
Die Trennung von Fluorid und Acetat erfolgte mit einem binären Kaliumhydroxid-Gradienten (Tabellen 1 und 2) auf einer Metrosep A Supp 16-Säule (L91). Die Analyten wurden mittels chemisch suppressierter Leitfähigkeit detektiert.
Tabelle 1. Anforderungen an die IC-Methode gemäß der USP-Monographie „Sodium Fluoride Tablets“ [4].
| Säule mit L91-Packung |
Metrosep A Supp 16 - 250/4,0 |
|---|---|
| Fluss | 1,0 ml/min |
| Eluet | A: 100 mmol/L Kaliumhydroxid B: Reinstwasser |
| Temperatur | 40 °C |
| Injektionsvolumen | 20 μL |
| Detektion | Suppressierte Leitfähigkeit |
Tabelle 2. Binäres Gradientenprofil gemäß der USP-Monographie «Sodium Fluoride Tablets» [4].
| Zeit (Minuten) | Eluent A (%) | Eluent B (%) |
|---|---|---|
| 0.0 | 15 | 85 |
| 7.0 | 15 | 85 |
| 8.0 | 80 | 20 |
| 15.0 | 80 | 20 |
| 15.1 | 15 | 85 |
| 25.0 | 15 | 85 |
Die vorgestellte IC-Methode zur Fluoridbestimmung in Natriumfluorid-Tabletten wurde gemäß den allgemeinen Anforderungen der USP und der USP-Monographie „Sodium Fluoride Tablets“ qualifiziert [4–7].
Die erforderliche Trennung von Fluorid und Acetat auf der A Supp 16 Säule wurde durch Anwendung eines Hydroxidgradienten erreicht (Tabelle 3). Das Chromatogramm ist in Abbildung 2 dargestellt.
Die relativen Retentionszeiten (rG, nicht angepasst) für Fluorid und Acetat betragen 1,0 bzw. 1,3. Diese einheitenlosen Werte werden automatisch mit der MagIC-Net-Software unter Anwendung der folgenden Formel berechnet:
rG = relative Retentionszeit, nicht angepasst
tRi = Retentionszeit Peak von Interesse
tRst = Retentionszeit des Referenzpeaks (Peak entsprechend der zu untersuchenden Substanz, Natriumfluorid)
Tabelle 3 zeigt, dass die Kriterien der Systemeignung erfüllt sind, einschließlich der Auflösung, des Tailing-Faktors und der relativen Standardabweichung (RSD) bei Mehrfachstandardinjektionen [4].
Tabelle 3. Anforderungen an die Systemeignungsprüfung und Ergebnisse der Studie.
| Parameter | Tatsächlich | USP-Anforderung | Status |
|---|---|---|---|
| Auflösung Fluorid/Acetat | 3,7 | > 1,5 | Bestanden |
| Tailing-Faktor für Fluorid | 1,4 | < 2,0 | Bestanden |
| RSD Fluorid (%, n=5) | 0,4 | < 2,0 | Bestanden |
Die Kalibrierung für die Probenanalyse wurde mit einem einzigen Standard von 2,0 μg/ml NaF durchgeführt, der sechsmal injiziert wurde. Die Probe wurde in doppelter Ausführung analysiert und erfüllte die entsprechenden USP-Validierungskriterien, wie in Tabelle 4 dargestellt.
Tabelle 4. Berechneter Prozentsatz bezogen auf die angegebene Menge an Natriumfluorid (NaF) in den verwendeten Tabletten, der bei der Analyse erreicht wurde.
| Parameter | Tatsächlich | USP-Anforderung | Status |
|---|---|---|---|
| Fluoridprobe [%] | 99,4 | 90–110 | Bestanden |
Die Ionenchromatographie (IC) hat die Qualifikationstests für die Quantifizierung des Fluoridgehalts in pharmazeutischen Tabletten in voller Übereinstimmung mit der USP-Monographie „Sodium Fluoride Tablets“ erfolgreich bestanden. Die Qualifizierung wurde gemäß den Richtlinien der USP durchgeführt.
Hinsichtlich der Systemeignung und der Probenanalyse hat die IC-Methode alle vordefinierten Akzeptanzkriterien bestanden, einschließlich Auflösung, Tailing-Faktor und relative Standardabweichung für wiederholte Standardinjektionen sowie für das Probenergebnis. Folglich hat sich die Ionenchromatographie als zuverlässige und hochgradig automatisierte Methode für die Quantifizierung von Fluorid in pharmazeutischen Präparaten qualifiziert, die sowohl benutzerfreundlich ist als auch genaue Ergebnisse liefert.
- Pollick, H. The Role of Fluoride in the Prevention of Tooth Decay. Pediatric Clinics of North America 2018, 65 (5), 923–940. https://doi.org/10.1016/j.pcl.2018.05.014.
- Yeung, C. A. A Systematic Review of the Efficacy and Safety of Fluoridation. Evid Based Dent 2008, 9 (2), 39–43. https://doi.org/10.1038/sj.ebd.6400578.
- ADA Science & Research Institute, LLC. Fluoride: Topical and Systemic Supplements. Department of Scientific Information, Evidence Synthesis & Translation Research, ADA Science & Research Institute, LLC. 2023.
- U. S. Pharmacopeia/National Formulary. USP Monographs, Sodium Fluoride Tablets; USP/NF, Rockville, MD, USA.
- U. S. Pharmacopeia/National Formulary. <621> Chromatography. In General Chapter; USP/NF, Rockville, MD, USA.
- U. S. Pharmacopeia/National Formulary. General Chapter, <1065> Ion Chromatography; USP-NF: Rockville, MD, USA, 2023. https://doi.usp.org/USPNF/USPNF_M897_01_01.html.
- U. S. Pharmacopeia/National Formulary. General Chapter, <1225> Validation of Compendial Procedures; USP-NF: Rockville, MD, USA, 2023. https://doi.org/10.31003/USPNF_M99945_04_01.
Applikationen teilen
Download PDF